發(fā)布時(shí)間: 2020-05-09 點(diǎn)擊次數(shù): 1313次
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。下面南京卡米洛生物的小編為您講解下各種ELISA試劑盒配置方法匯總?cè)缦拢?1) ELISA試驗(yàn)停止液(2) ELISA底物緩沖液(3) ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液(4)ELISA試驗(yàn)包被緩沖液(5)ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液(6)ELISA試驗(yàn)稀釋液(7)規(guī)范品稀釋液。
(1) ELISA試驗(yàn)停止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴參加濃硫酸(98%)21.7ml。
(2) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(3) ELISA試驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml。
(4) ELISA試驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運(yùn)用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
(5) ELISA試驗(yàn)洗刷緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml。
(6)規(guī)范品稀釋液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L:
L酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
L酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,加去離子水約800mL充分拌和溶解,然后參加濃鹽酸或許氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4,后定容到1L,濃度為10mmol/L。
(7) ELISA試驗(yàn)稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗刷緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗刷液配成5~10%運(yùn)用。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
為了保證ELISA試驗(yàn)的準(zhǔn)確性,試驗(yàn)操作中參加的緩沖液和各組分一定要準(zhǔn)確,將洗刷液參加酶標(biāo)板中的時(shí)候避免參加的試劑混入別的一個(gè)酶標(biāo)孔,謹(jǐn)防交叉污染。